Există și alte metode de purificare a produselor PCR?

2024 Autor: Miles Stephen | [email protected]. Modificat ultima dată: 2023-12-15 23:40

Pentru acele aplicații care necesită PCR curatarea sau validarea PCR rezultate, Acolo sunt doi metode urmate in general: produs PCR izolare folosind o coloană și gel purificare dintr-un gel de agaroză.

Aici, ce tip de cromatografie este utilizat pentru purificarea produselor PCR?

Pentru purificarea produselor PCR, se utilizează cromatografia de excludere a mărimii. Aceasta prinde molecule mici, cum ar fi proteinele, grunduri , și nucleotidele, în timp ce moleculele mari, cum ar fi produsele PCR, sunt prea mari pentru a intra în margele și a trece prin coloană în tuburile de colectare.

De asemenea, cum purifică ADN-ul? Practic, poți purifica ta ADN probe prin lizarea probelor de celule și/sau țesut folosind cea mai adecvată procedură (destructură mecanică, tratament chimic sau digestie enzimatică), izolând acizii nucleici de contaminanții săi și precipitându-i într-o soluție tampon adecvată.

În plus, de ce purificăm produsul PCR?

Purificarea de ADN de la a PCR reacția este de obicei necesară pentru utilizarea în aval și facilitează îndepărtarea enzimelor, nucleotidelor, primerilor și componentelor tampon. Metodele utilizate în mod obișnuit folosesc coloane de spin care conțin o matrice de silice la care ADN-ul poate fi legat selectiv în prezența sărurilor haotrope.

De ce trebuie curățat ADN-ul?

Noi curat sus ADN din soluții apoase pentru a îndepărta sărurile tampon, enzimele sau alte substanțe care ar putea afecta aplicațiile din aval. Exemplele includ reacția PCR curat sus, curat sus după digerări de restricţie şi curat de genomic sau plasmid ADN contaminate cu proteine/resturi celulare.