Cuprins:

Cum găsiți concentrația de ADN din absorbanță?
Cum găsiți concentrația de ADN din absorbanță?

Video: Cum găsiți concentrația de ADN din absorbanță?

Video: Cum găsiți concentrația de ADN din absorbanță?
Video: How to calculate DNA concentration in Excel from absorbance reading 2024, Noiembrie
Anonim

concentrația de ADN este estimată prin măsurarea absorbanta la 260 nm, ajustând A260 măsurarea turbidității (măsurată prin absorbanta la 320 nm), înmulțind cu factorul de diluție și folosind relația pe care un A260 de 1,0 = 50 pg/ml dsDNA pur.

La fel, oamenii se întreabă, cum găsești concentrația de ADN?

Pentru a determina concentrația de ADN din proba originală, efectuați următorul calcul:

  1. Concentrația dsDNA = 50 μg/mL × OD260 × factor de diluție.
  2. Concentrația dsDNA = 50 μg/mL × 0,65 × 50.
  3. Concentrația dsDNA = 1,63 mg/mL.

De asemenea, ce este o concentrație bună de ADN? A bun calitate ADN eșantionul ar trebui să aibă un A260/A280 raport de 1,7-2,0 și un A260/A230 un raport mai mare de 1,5, dar deoarece sensibilitatea diferitelor tehnici la acești contaminanți variază, aceste valori ar trebui luate doar ca ghid pentru puritatea probei dumneavoastră.

În acest fel, ADN-ul absoarbe la 280 nm?

Raportul absorbanței la 260 nm vs 280 nm este folosit în mod obișnuit pentru a evalua ADN contaminarea soluțiilor de proteine, deoarece proteinele (în special, aminoacizii aromatici) absorbi lumina la 280 nm.

Cum folosești NanoDrop pentru concentrarea ADN-ului?

Practic cel nanopicătură vă oferă opțiunea de a selecta ADN , ARN, proteine. Trebuie să selectezi ADN , apoi puneți 2 μL de apă (preferabil mili Q) selectați „Blank” după aceea puneți încă 2 μL de apă pentru a confirma că măsura este 0. Apoi puneți 2 μL din proba dumneavoastră. Veți obține măsurarea.

Recomandat: