Cât costă transformarea unei ligaturi?

2024 Autor: Miles Stephen | [email protected]. Modificat ultima dată: 2023-12-15 23:40

Transformare . Adăugați între 1-5 µl de ligaturare amestec la celule competente pentru transformare . Extins ligaturare cu PEG provoacă o cădere în transformare eficiență (rapid Ligare Kit). Electroporarea este recomandată pentru constructii mari (>10.000 bp).

De aici, de cât produs de ligatură am nevoie pentru transformare?

Transformare . Adăugați între 1-5 µl de ligaturare amestec la celule competente pentru transformare . Extins ligaturare cu PEG provoacă o cădere în transformare eficiență (rapid Ligare Kit). Electroporarea este recomandată pentru constructii mari (>10.000 bp).

Ulterior, întrebarea este, ce este Ligarea și transformarea? Într-un experiment tipic de clonare, cercetătorii introduc mai întâi o bucată de ADN, cum ar fi o genă, într-o bucată circulară de ADN numită plasmidă. Acest pas folosește enzime de restricție și ADN ligază și se numește a ligaturare . Dupa o ligaturare , următorul pas este transferul ADN-ului în bacterii într-un proces numit transformare.

Ulterior, se mai poate întreba, de cât ADN este nevoie pentru o ligatură?

Concentrația totală de vector + insert ar trebui să fie între 1-10 μg/ml pentru eficient ligaturare . Vector:Inserați rapoarte molare între 1:1 și 1:10 (1:3 este tipic). Dacă nu sunteți sigur de dvs ADN concentrații, efectuați mai multe ligaturi cu rapoarte diferite.

Cât timp poți păstra o reacție de ligatură?

Ligaturile pot se face la temperatura camerei sau mai rece (gândiți-vă la 12-16°C) peste noapte sau chiar pentru câteva zile, daca tu ești foarte ocupat. Poti de asemenea depozitați o ligatură la frigider si scoate-l mai tarziu pentru a continua ligatura la temperatura camerei pentru ca lung după cum este necesar.